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以下是關(guān)于ELISA試劑盒中顯色液A和B液的詳細(xì)說明：
一、主要成分與作用
顯色液A（過氧化氫溶液）?
主要成分為H?O?，作為受氫體參與HRP（辣根過氧化物酶）催化反應(yīng)，生成活性氧中間體?。
顯色液B（TMB溶液）?
主要成分為四甲基聯(lián)苯胺（TMB），作為供氫體（DH?），與HRP催化產(chǎn)生的活性氧反應(yīng)生成藍(lán)色陽離子自由基，終止后變?yōu)辄S色?。
二、反應(yīng)機(jī)制
HRP催化反應(yīng)?：
HRP + H?O? → HRP-活性氧復(fù)合物
HRP-活性氧復(fù)合物 + TMB → 藍(lán)色產(chǎn)物 + HRP
終止液（如硫酸）加入后，藍(lán)色產(chǎn)物轉(zhuǎn)化為黃色?。
三、操作注意事項
添加順序?
需先加A液（H?O?）后加B液（TMB），以確保HRP充分催化H?O?生成活性氧，再與TMB反應(yīng)?。
穩(wěn)定性?
TMB顯色液需現(xiàn)配現(xiàn)用（2小時內(nèi)），避免氧化失效?。
操作時需戴手套，避免皮膚接觸（TMB為潛在致癌物）?。
四、其他底物對比
酶類型顯色液A顯色液B產(chǎn)物顏色
HRPH?O?TMB/OPD藍(lán)→黃
AP緩沖液PNP（對硝基苯磷酸酯）黃（405nm）
GOD葡萄糖對硝基藍(lán)四氮唑藍(lán)沉淀?
五、常見問題
顯色異常?：若終止液含還原劑，可能導(dǎo)致藍(lán)色產(chǎn)物褪色?。
替代方案?：OPD可作為TMB的替代顯色劑，但毒性更高?。
注：以上資料僅供參考，不作為實際數(shù)據(jù)，如需其他請咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。
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