人鐵蛋白(Ferritin)ELISA試劑盒檢測原理
人鐵蛋白(Ferritin)ELISA試劑盒的檢測原理主要基于?雙抗體夾心法酶聯免疫吸附試驗?(ELISA),通過特異性抗體識別并定量檢測樣本中的人鐵蛋白濃度,具有高靈敏度和良好特異性。
一、核心檢測流程
固相抗體包被?
酶標板微孔內預包被了高親和力的?特異性單克隆抗人鐵蛋白抗體?,作為“捕獲抗體”,用于固定樣本中的目標抗原。
樣本與標準品加樣?
向微孔中加入待測樣本或已知濃度的標準品。若樣本中含有鐵蛋白,會與包被抗體特異性結合,形成“固相抗體-抗原”復合物。
酶標抗體結合?
加入?HRP(辣根過氧化物酶)標記的檢測抗體?,該抗體識別鐵蛋白的另一表位,從而形成“固相抗體-抗原-酶標抗體”的夾心結構。
洗滌去除非特異成分?
通過多次洗滌,去除未結合的酶標抗體及其他雜質,減少背景干擾,提高檢測準確性。
顯色反應?
加入TMB底物液,在HRP催化下生成藍色產物,反應一定時間后加入1N鹽酸終止反應,溶液顏色由藍變黃。
吸光度測定與定量分析?
使用酶標儀在450nm波長下測定各孔的吸光度(OD值)。OD值與樣本中鐵蛋白濃度呈正比,通過標準曲線即可計算出待測樣本的實際濃度。
二、特點
?高特異性?:采用兩種不同表位的單克隆抗體,顯著降低交叉反應風險。
?靈敏度高?:可檢測低至幾ng/mL的鐵蛋白水平,適用于早期篩查和科研定量。
?操作標準化?:試劑盒提供完整組分和說明書,適合批量樣本處理。
注意:以上僅供參考,不作為實際數據,實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。
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