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    如何高效測定伏格列波糖？科諾美液相色譜-柱后衍生-熒光法來助力
    
							
    
								來源：科諾美（北京）科技有限公司  
								2026年02月05日 16:12  
                                
    
    
    
        
							
    
						
    
						
    
							
    伏格列波糖是一種降糖藥物，適用于改善糖尿病餐后高血糖。伏格列波糖是一種α-糖苷酶抑制劑，它可以抑制腸道內雙糖酶（如蔗糖酶、麥芽糖酶和乳糖酶）的活性，從而減緩碳水化合物的分解和吸收。這樣可以減少血糖的上升速度，有助于控制餐后血糖水平。由于伏格列波糖沒有紫外吸收，所以在藥典中采用了柱后衍生-熒光檢測器檢測的方法。
    本應用參考《中國藥典》伏格列波糖分析方法，采用氨基色譜柱、以磷酸鹽緩沖液和乙腈為流動相進行分離，用牛磺酸與高碘酸鈉溶液為衍生液進行柱后衍生反應，最終用熒光檢測器進行檢測。方法自動化程度高，穩定性好，靈敏度高，過程簡便易操作，適用于伏格列波糖片中伏格列波糖的含量測定。



    01
    實驗部分

    儀器設備：Leaps超高效液相色譜儀
    四元梯度泵P40、自動進樣器A10C、柱溫箱C10、熒光檢測器D50、柱后衍生裝置R10（1500 µL反應器）
    如何高效測定伏格列波糖？科諾美液相色譜-柱后衍生-熒光法來助力
    溶液配制
    磷酸鹽緩沖液：取二水合磷酸二氫鈉1.56 g與磷酸氫二鈉3.58 g，加水1000 mL使溶解，用磷酸或*試液調節pH值至6.5。
    辛烷磺酸鈉溶液：稱取0.12 g辛烷磺酸鈉，加入37 mL磷酸鹽緩沖液，再加入63 mL乙腈。
    熒光反應液：取牛磺酸6.25 g與高碘酸鈉2.56 g，加水溶解并稀釋至1000 mL。
    標準儲備液（1 mg/mL）：精確稱取伏格列波糖，用辛烷磺酸鈉溶液溶解，制成1 mg/mL的伏格列波糖儲備液。
    標準曲線溶液：用辛烷磺酸鈉溶液稀釋標準儲備液，分別得到濃度為0.1 µg/mL、0.2 µg/mL、0.5 µg/mL、1 µg/mL、5 µg/mL、10 µg/mL的標準曲線溶液。
    色譜條件
    流動相：A：磷酸鹽緩沖液37 %；B：乙腈63 %
    流速：0.8 mL/min
    色譜柱：Lotus NH2  4.6 mm*250 mm, 5 µm
    進樣量：100 µL
    柱溫：40 ℃
    熒光檢測器：激發波長：350 nm、發射波長：430 nm
    衍生液：熒光反應液，流速：0.8 mL/min，衍生溫度：120 ℃
    冷卻管：2 m，室溫（25 ℃）
    02
    實驗結果
    標準譜圖



    如何高效測定伏格列波糖？科諾美液相色譜-柱后衍生-熒光法來助力
    圖1 伏格列波糖典型色譜圖
    線性及檢出限


    依次將標準曲線溶液0.1 µg/mL、0.2 µg/mL、0.5 µg/mL、1 µg/mL、5 µg/mL、10 µg/mL按濃度從低到高進樣，以濃度-峰面積繪制標準曲線。伏格列波糖在線性范圍內相關系數大于0.9999。
    表1 線性及檢出限結果表
    如何高效測定伏格列波糖？科諾美液相色譜-柱后衍生-熒光法來助力

    精密度


    將2 µg/mL濃度溶液重復進樣6次，計算保留時間與峰面積的精密度，結果如表2所示。
    表2 精密度結果表
    如何高效測定伏格列波糖？科諾美液相色譜-柱后衍生-熒光法來助力

    如何高效測定伏格列波糖？科諾美液相色譜-柱后衍生-熒光法來助力
    圖2 伏格列波糖精密度色譜圖

    03
    結論
    本應用方案采用Chromai Leaps超高效液相色譜儀，搭配R10柱后衍生裝置，參考《中國藥典》，使用熒光檢測器對伏格列波糖含量測定方法進行方法學考察。在線性范圍內，線性相關系數大于0.9999；保留時間精密度為0.15 %，峰面積精密度為1.14 %；檢出限為0.012 µg/mL，滿足藥典要求。



    
						
    
					
    
					
					
    
						
						  
    
							
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