豬細胞系污染有哪些常見原因？

豬細胞系是指從豬的組織中分離并經過初次傳代成功后，能夠持續培養并進行多次傳代的細胞群體。這些細胞系可以用于研究豬的生物學特性、疾病模型、藥物篩選以及異種移植等領域。豬細胞系污染的常見原因包括：

一、操作流程污染：

1、?樣本處理不當?

組織取樣時若碘酒消毒后脫碘不chedi，殘留碘會直接抑制細胞生長。操作過程中未嚴格遵循無菌規范（如超凈臺未充分紫外線消毒）易引入環境微生物。

2、?器材滅菌缺陷?

培養瓶、移液管等器材若高壓蒸汽滅菌不chedi，可能殘留大腸桿菌或葡萄球菌等常見污染菌。

二、環境與操作風險：

1、培養箱維護不足：長期未更換水盤、托盤未酒精消毒，導致霉菌滋生。

2、超凈臺管理混亂：物品堆積過多，紫外線無法全覆蓋，氣流穩定性受影響。

3、人員著裝不規范：細胞房內人員密集，未按要求穿戴無菌服、口罩，引入外源污染物。

三、試劑與細胞自身問題：

血清與培養基污染：血清滅活處理不當可能破壞營養成分，或凍存細胞本身攜帶污染物。

細胞系交叉污染：購買的豬乳腺上皮細胞若身份錯誤（如被Hela細胞污染），可能導致實驗結果偏差。

四、支原體污染：

由于支原體沒有細胞壁，常規的過濾和消毒方法難以去除，且其體積小，不易被常規顯微鏡檢測到，因此在細胞培養中較為常見。

五、細胞來源問題：

如果從不可靠的供應商或未經驗證的細胞庫獲取細胞，可能本身就帶有污染。

六、抗生素濫用：

長期在培養基中添加抗生素，雖然能抑制某些細菌，但也會促進耐藥菌株的生長，掩蓋支原體等隱性污染，最終導致大規模污染爆發。

七、關鍵防控建議：

1、?血清篩選?：使用無血清培養基或經支原體檢測的血清。

2、?定期檢測?：每2周通過DAPI染色或PCR法排查支原體。

3、?分區操作?：嚴格區分組織處理區與細胞培養區，避免交叉污染。

預防豬細胞系污染的措施包括嚴格遵守無菌操作規程、定期清潔和消毒實驗室環境、使用高質量的試劑和培養基、定期檢測細胞系的純度和身份、避免交叉污染、以及合理使用抗生素等。