標簽：Elisa 本生試劑盒 標準品 抗體 封板膜 一次性吸頭 大鼠試劑盒
以下是天正信達關于大鼠ELISA試劑盒加樣實驗常見問題的解答及解決方案：
一、加樣不準確問題
移液器校準不當
需定期用標準砝碼校準移液器，特別是小體積加樣(如5-10μL)。
加樣時吸頭需垂直插入液體，緩慢勻速操作，避免氣泡產生。
加樣時間過長
單次加樣時間控制在10分鐘內，樣本較多時分批操作。
使用多道移液器可提高效率，減少孔間差異。
液體殘留或濺灑
加樣后檢查孔壁是否殘留液體，用吸水紙輕拭酶標板表面。
加酶試劑時避免快速操作，防止液體濺出孔外。
二、樣本處理問題
血清/血漿樣本
血清需靜置1-2小時后離心(3000rpm，15分鐘);血漿需采血后立即混勻抗凝劑再離心。
溶血或脂血樣本需離心后取上清，避免血紅蛋白干擾。
樣本保存不當
短期存放于2-8℃，長期保存需-20℃以下，避免反復凍融。
三、實驗操作問題
孵育條件不穩定
溫育時使用恒溫箱(37℃±0.5℃)，避免溫度波動。
封板膜需一次性使用，防止蒸發和污染。
洗滌不凈
每孔注滿洗滌液，靜置30秒后棄去，重復4-6次，最后拍干。
自動洗板機需檢查管路是否堵塞。
顯色異常
TMB顯色需避光，反應時間控制在15-30分鐘，及時終止。
若顯色過弱，檢查酶標抗體活性或延長孵育時間。
四、質量控制建議
設置對照
必須包含空白孔、陰性對照和陽性對照，驗證實驗有效性。
重復性差處理
復孔加樣需使用同一移液器，保持操作一致性。
板內變異系數應<15%，否則需排查加樣或洗滌問題。
五、其他注意事項
試劑污染：避免使用含NaN3的緩沖液(抑制HRP活性)。
環境控制：操作臺需清潔，移液器吸頭一次性使用。
具體問題可結合試劑盒說明書調整。
注：以上資料僅供參考，不作為實際標準，具體請咨詢技術老師。
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